SDS-PAGE和分子筛过滤层析测定蛋白质分子量在原理和方法上有何不同。

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sds分离靠的是在电场中蛋白质分子跟page的结合后的分子量大小从而在凝胶中跑的速度不同而分开的。

分子筛是根据不同分子量的分子大小不同,从而进行蛋白质分离,达到测量分子量的目的的。


SDS-PAGE:聚丙烯酰胺凝胶电泳,作用:用于分离蛋白质和寡核苷酸。

作用原理:聚丙烯酰胺凝胶为网状结构,具有分子筛效应。它有两种形式:非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native-PAGE)和SDS-聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE);非变性聚丙烯酰胺凝胶,在电泳的过程中,蛋白质能够保持完整状态,并依据蛋白质的分子量大小、蛋白质的形状及其所附带的电荷量而逐渐呈梯度分开。

而SDS-PAGE仅根据蛋白质亚基分子量的不同就可以分开蛋白质。该技术最初由shapiro于1967年建立,他们发现在样品介质和丙烯酰胺凝胶中加入离子去污剂和强还原剂(SDS即十二烷基硫酸钠)后,蛋白质亚基的电泳迁移率主要取决于亚基分子量的大小(可以忽略电荷因素)。



sds分离靠的是在电场中蛋白质分子跟page的结合后的分子量大小从而在凝胶中跑的速度不同而分开的,分子筛是根据不同分子量的分子大小不同,从而进行蛋白质分离,达到测量分子量的目的的

都是根据分子大小分离,但方法上一个是电泳,一个是层析。分子筛的原理是分子小的走的路程远,出来晚;PAGE则是分子大的阻力大,跑得慢。最后结果正好相反。

一个是电泳,一个是过滤。

SDS法和分子筛测得血红蛋白分子量不同,为什么?
答:如糖蛋白和某些酶(如葡萄糖氧化酶、木瓜蛋白酶以及胃蛋白酶等)与SDS的亲和力较低,测到的分子量偏低;组蛋白F1,本身带有大量正电荷:虽然结合了正常量的SDS,仍不能完全掩盖其原有正电荷,结果使运动速度减慢。故用SDS-PAGE测得的Mr要大。而含二硫键多的蛋白质,二硫键被打开后,致使Stokes半径...

SDS-PAGE电泳的基本原理?
答:因此,各种蛋白质 SDS复合物在电泳时的迁移率,不再受原有电荷和分子形状的影响,只是分子量的函数。这种电泳方法称为SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(简称SDS—PAGE)。由于SDS PAGE可设法将电泳时蛋白质电荷差异这一因素除去或减小到可以忽略不计的程度,因此常用来鉴定蛋白质分离样品的纯化程度,如果被鉴定的蛋白质...

电泳跑胶SDS-PAGE的定义是什么?
答:SDS-PAGE即聚丙烯酰氨凝胶电泳 详细资料如下:聚丙烯酰胺凝胶电泳是网状结构,具有分子筛效应,它有两种形式,一种是非变性聚丙烯酰胺凝胶,蛋白质在电泳中保持完整的状态,蛋白在其中依三种因素分开:蛋白大小,形状和电荷。而SDS-PAGE仅根据蛋白分子量亚基的不同而分离蛋白。这个技术首先是1967年由shapiro...

sds page原理
答:2)SDS是阴离子变性剂,与蛋白质结合后加热能把折叠的蛋白质打开(如果这个蛋白质是多亚基的话,比如2个亚基,处理后就形成两个多肽链),这样所有的蛋白质都有相似的形状和荷质比,这样就排除了蛋白质形状和所带电荷造成的影响,只跟蛋白质的分子量有关 3)在电场的影响下,带有SDS的负电荷蛋白质向...

sds-page凝胶电泳怎么制备
答:SDS-PAGE电泳可用于分离蛋白质和核苷酸 ,这里综述了SDS-PAGE实验原理、试剂和器材、以及实验操作步骤。一.实验原理:SDS-PAGE是对蛋白质进行量化,比较及特性鉴定的一种经济、快速、而且可重复的方法。该法是依据混合蛋白的分子 量不同来进行分离的。SDS是一种去垢剂,可与蛋白质的疏水部分相结合,破坏...

有关sds-page的描述不正确的是
答:有关sds-page的原理是电场中蛋白质的移动速度与蛋白质分子量有关以及SDS与蛋白质结合成复合物后在电场中向负极移动是错误的描述 小分子量蛋白离负极近 分子量的大小与相对迁移率成负线性关系 聚丙烯酰胺凝胶电泳,是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的一种常用电泳技术,用于分离蛋白质和寡核苷酸。具有分子筛...

急!比较说明SDS-PAGE和普通PAGE电泳分离生物大分子的原理和特点?一道考 ...
答:论述题的话你把他们两个都介绍遍就差不多了。普通PAGE是网状结构,具有分子筛效应,是一种非变性聚丙烯酰胺凝胶,蛋白质在电泳中保持完整的状态,蛋白在其中依三种因素分开:蛋白大小,形状和电荷。 而SDS-PAGE仅根据蛋白分子量亚基的不同而分离蛋白。蛋白质亚基的电泳迁移率主要取决于亚基分子量的大小,...

一道生化题,不知道从什么角度回答
答:我个人理解出题者的意思是,把这个蛋白质用酶切开,得到两个肽段,如何证明是从同一个蛋白质上裂解下来的片段。那就直接SDS-PAGE测定分子量,两者叠加看是否等于总的一个蛋白质分子量。我再尝试一下其他题1 CNBr 2 分子筛层析(凝胶过滤) 3 MS(质谱)SDS-PAGE 分子筛层析 超速离心 4 SDS-PAGE ...

使SDS-PAGE具有高分辨率的三个因素是什么?
答:1、聚丙烯酰胺凝胶为网状结构,具有分子筛效应。2、SDS-PAGE电泳使用的是不连续系统。3、SDS-PAGE仅根据蛋白质亚基的分子量大小就能使不同的蛋白质分离,因为用了去污剂使它们的电荷都一样了。

SDS-PAGE电泳测蛋白分子量实验中样品溶液中各种试剂的作用是什么_百度...
答:在聚合过程中,TEMED催化过硫酸铵产生自由基,后者引发丙烯酰胺单体聚合,同时甲叉双丙烯酰胺与丙烯酰胺链间产生甲叉键交联,从而形成三维网状结构。PAGE根据其有无浓缩效应,分为连续系统和不连续系统两大类,连续系统电泳体系中缓冲液pH值及凝胶浓度相同,带电颗粒在电场作用下,主要靠电荷和分子筛效应。...