电泳跑胶SDS-PAGE的定义是什么?
1，浓缩胶的要求就是将所有蛋白在浓缩胶和分离胶梯度的时候将所有蛋白压缩成一条线，保证他们在同一起跑线上。如果蛋白样品是不同时间的同一种，可能就是浓缩胶没摇匀。
至于加样散，原因就可能是胶质不均了。对于结果应该影响不大。电泳时条带歪了，说明分离胶不匀，最前面的溴酚蓝如果不在一条线上，就是这个问题，对于最终结果有影响，建议重做。当然，在灌注浓缩胶前，你可能使用30%酒精封闭过，酒精除不干净，或者滤纸吸干酒精碰触了胶面，都会有影响，前者会让蛋白传样，导致所有蛋白散了，后者会导致下面电泳条带歪了。
染色后偏下方有紫色，我不清楚，只能认为是杂质……，灌胶漏了无所谓，只要凝固后分离胶能占全版的一半，就能用，兑电泳结果没影响。胶配好后混匀不难，手摇即可。
初学western可以去丁香园看看视频，顺便学下blot，对于以后试验进行会有所帮助。
传送门：http://bbs.bbioo.com/forum.php?mod=viewthread&tid=37871&extra=&highlight=western&page=1
你好， SDS-PAGE跑电泳时，跑到浓缩胶和分离胶分界处时一般是要换电压的。 具体是40变60还是80变120要根据实际试验的时间来确定，而且这个时间的要求不会很严格，也就是说对电压的要求不严。 我做这个试验时，师姐给我讲的是由80变到120~140即可
SDS-PAGE即聚丙烯酰氨凝胶电泳详细资料如下：
聚丙烯酰胺凝胶电泳是网状结构，具有分子筛效应，它有两种形式，一种是非变性聚丙烯酰胺凝胶，蛋白质在电泳中保持完整的状态，蛋白在其中依三种因素分开：蛋白大小，形状和电荷。
而SDS-PAGE仅根据蛋白分子量亚基的不同而分离蛋白。这个技术首先是1967年由shapiro建立，他们发现在样品介质和丙烯酰胺凝胶中加入离子去污剂和强还原剂后，蛋白质亚基的电泳迁移率主要取决于亚基分子量的大小，电荷因素可以忽视。
SDS是阴离子去污剂，作为变性剂和助溶试剂，它能断裂分子内和分子间的氢键，使分子去折叠，破坏蛋白分子的二。三级结构。而强还原剂如巯基乙醇，二硫苏糖醇能使绊胱氨酸残基间的二硫键断裂。在样品和凝胶中加入还原剂和SDS后，分子被解聚成多肽链，解聚后的氨基酸侧链和SDS结合成蛋白- SDS胶束，所带的负电荷大大超过了蛋白原有的蛋白量，这样就消除了不同分子间的电荷差异和结构差异。
SDS-PAGE一般采用的是不连续缓冲系统，于连续缓冲系统相比，能够有较高的分辨率。
浓缩胶的作用是有堆积作用，凝胶浓度较小，孔径较大，把较稀的样品加在浓缩胶上，经过大孔径凝胶的迁移作用而被浓缩至一个狭窄的区带。当样品液和浓缩胶选TRIS/HCL缓冲液，电极液选TRIS/甘氨酸。电泳开始后，HCL解离成氯离子，甘氨酸解离出少量的甘氨酸根离子。蛋白质带负电荷，因此一起向正极移动，其中氯离子最快，甘氨酸根离子最慢，蛋白居中。电泳开始时氯离子泳动率最大，超过蛋白，因此在后面形成低电导区，而电场强度与低电导区成反比，因而产生较高的电场强度，使蛋白和甘氨酸根离子迅速移动，形成以稳定的界面，使蛋白聚集在移动界面附近，浓缩成一中间层。
sds-page电泳跑到什么时候停
答：你好， SDS-PAGE跑电泳时，跑到浓缩胶和分离胶分界处时一般是要换电压的。 具体是40变60还是80变120要根据实际试验的时间来确定，而且这个时间的要求不会很严格，也就是说对电压的要求不严。 我做这个试验时，师姐给我讲的是由80变到120~140即可 ...
sas-page浓度
答：问题应该是sds-page电泳时蛋白样品的浓度需要多大合适吧，分离胶浓度的选择主要取决于目的蛋白的分子量大小，不同的分离胶浓度对不同的目的蛋白分子量的分辨率不一样。下层胶)：不同浓度的SDS-PAGE分离胶的最佳分离范围：SDS-PAGE分离胶浓度，最佳分离范围：6%胶，50-150kD 8%胶，30-90kD 10%胶，20...
sds-page电压多少mini胶
答：SDS-PAGE电压要看具体的电泳仪 一般来说是设置成恒压150V~200V 如果是恒压200V，对于两块0.75mm的胶来说，电流开始时为100mA，结束时应该为60mA 对于两块1.5mm的胶来说，开始时应为110mA，结束时为80mA
SDS-PAGE检测蛋白质分子量的基本原理
答：分别取样品若干ml于离心管中,按1/1～1/5比例加入5×样品缓冲液,再沸水浴中加热3～5min,取出待用.用微量注射器分别吸取不超过30μl不同浓度的标准蛋白样品和试验样品注入样品槽.点样结束后,调节电泳仪电流到10mA（2～3mA/em）,保持电流稳定不变,当溴酚蓝迁移到离分离胶底1～2cm时,即可停止电泳...
SDS-PAGE电泳求助专题
答：具有机械性能好、化学性能稳定、灵敏度好、分辨率高的优点。PAGE应用十分广泛，可用于蛋白质、酶、核酸等生物分子的分离、定性、定量和少量制备，还可测定分子量和等电点等。胶缓冲液系统的配制 在SDS－PAGE不连续电泳中，制胶缓冲液使用的是Tris－HCL缓冲系统，浓缩胶是pH6.7，分离胶pH8.9；而电泳...
sds-page与native-page的区别是什么?
答：2、Native-PAGE：是在不加入SDS 和巯基乙醇等变性剂的条件下，对保持活性的蛋白质进行聚丙烯酰胺凝胶电泳。二、作用不同 1、sds-page：用于分离蛋白质和寡核苷酸。2、Native-PAGE：用于酶的鉴定、同工酶分析和提纯。三、特点不同 1、sds-page：能断裂分子内和分子间的氢键，使分子去折叠，破坏蛋白...
page的操作流程
答：SDS-PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳操作流程 1.将玻片装置搭建起来，加水静置，检查是否有渗漏。2.配制分离胶 加入2玻片间，加时尽量减少气泡，由玻片一端连续、快速、均匀的注入，可适当摇晃，使得分离胶上界面尽量水平；加保护液（0.1% SDS）静置凝聚。加保护液时，枪头应均匀扫过玻片上沿，切不可由一端...
SDS-PAGE电泳怎么使MARK跑的更重直点,同时使样品分离的更开一点了
答：否则你怎么跑都是歪的，我用无水乙醇封闭的时候，会摇晃下，这样能保证分离胶顶边成一直线 4、你有MARK的时候，不一定要看“溴酚蓝快要跑出胶的时候停就行”，要让你的目的蛋白尽可能的充分拉开 5、不能随便降低胶的浓度，浓度越低，孔径就越大，适合的目的蛋白分子量就越大 ...
在SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳中,sds,sds-page,AB,AP,TEMED分别起什么作用...
答：SDS 破坏蛋白的二硫键使蛋白变性，改变蛋白结构。同时给蛋白附上大量的负电荷。SDS -page 预制胶，是在塑料胶板里的预先做好的一种胶。就是买来可以直接用的 AB 你是指A、B 液么。一般A液里是丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺、B液一般是SDS和缓冲液，AP 10%过硫酸铵 催化剂，催化单丙...
sdspage电泳 样品的量应该多少
答：sdspage电泳 样品的量应该多少 浓度没有硬性要求，但上样时的蛋白质总量最好在50-100ug左右。条带才比较明显可见。如若上样前浓度很低，可进行冻干，把体积浓缩一下测完蛋白浓度后上样。常规样品都不用去管PH值,因为上样缓冲液中含有TRIS-HCl,缓冲力比较强,可以中和你样品PH.除非你样品中盐离子(...
