高效液相色谱方法及应用的目录
第一章 绪论
第一节 高效液相色谱法的特点
一、与经典液相色谱法比较，高效液相色谱法具有更高的分离效率和更低的柱压降。
二、与气相色谱法比较，高效液相色谱法适用于极性、非极性及具有不同分子量的化合物分离。
三、高效液相色谱法的优点包括：速度快、灵敏度高、样品用量少、色谱柱可重复使用等。
四、高效液相色谱方法自20世纪70年代问世以来，得到了迅速发展。
第二节 高效液相色谱法的分类
一、按溶质在两相分离过程中的物理化学原理，高效液相色谱法可分为吸附色谱法、分配色谱法、离子交换色谱法和排阻色谱法等。
二、按溶质在色谱柱洗脱的动力学过程，高效液相色谱法可分为正相色谱法和反相色谱法等。
第三节 高效液相色谱法的应用范围和局限性
一、应用范围：广泛应用于药物分析、生物化学、环境监测、食品分析等领域。
二、方法的局限性：对于极性相近的组分分离效果不佳，且对于样品制备要求较高。
参考文献
第二章 高效液相色谱仪简介
第一节 流动相及储液罐
一、储液罐：用于储存流动相，确保流动相的纯净和稳定。
二、流动相脱气：去除流动相中的气泡，以避免对色谱分离造成干扰。
第二节 高压输液泵及梯度洗脱装置
一、高压输液泵：提供高压，确保流动相以恒定流速流过色谱柱。
二、梯度洗脱装置：用于实现流动相的梯度变化，以达到更好的分离效果。
第三节 进样装置
一、停流进样装置：通过停止流动相流动，实现样品的注入。
二、六通阀进样装置：通过六通阀切换，实现样品的进样和流动相的冲洗。
三、自动进样器：实现样品的自动进样，提高分析效率。
第四节 色谱柱
一、柱材料及规格：根据分离需求选择合适的柱材料和规格。
二、柱填料：填料的选择对分离效果至关重要。
三、保护柱：用于保护色谱柱，延长其使用寿命。
四、柱连接方式：确保色谱柱与输液系统的良好连接。
五、柱温控制：通过控制柱温，优化分离效果。
第五节 检测器
一、检测器的分类和响应特性：包括紫外吸收检测器、折光指数检测器、电导检测器、荧光检测器、蒸发光散射检测器等。
二、紫外吸收检测器：通过检测样品在紫外光区域的吸收，实现组分的定量分析。
参考文献
第三章 液固色谱法和液液色谱法
第一节 分离原理
一、吸附系数：表征溶质在固定相和流动相之间吸附能力的大小。
二、分配系数：表征溶质在固定相和流动相之间的分配平衡关系。
第二节 固定相
一、液固色谱固定相：固体固定相，如硅胶、氧化铝等。
二、液液色谱固定相：液体固定相，如醇、酸、碱等。
第三节 流动相
一、表征溶剂特性的重要参数：如极性、折射率、粘度等。
二、液固和液液色谱的流动相：选择与固定相匹配的流动相，以实现良好的分离效果。
第四节 二元溶剂体系中液固和液液色谱的保留规律
一、溶质保留值的基本方程式：描述溶质在色谱柱上的保留行为。
二、液固色谱的保留值方程式：考虑吸附系数和分配系数对保留值的影响。
三、液液色谱的保留值方程式：考虑分配系数对保留值的影响。
参考文献
第四章 键合相色谱法
第一节 分离原理
一、正相键合相色谱法的分离原理：基于溶质与固定相之间的正相吸附作用。
二、反相键合相色谱法的分离原理：基于溶质与固定相之间的反相吸附作用。
第二节 固定相
一、键合固定相的制备及分类：根据不同的分离需求，选择不同的键合固定相。
二、键合固定相的性质：包括选择性、稳定性等。
三、使用键合固定相应注意的问题：如固定相的流失、污染等。
第三节 流动相
一、溶剂的选择性分组：根据溶剂的极性、溶解度等特性进行分组。
二、在键合相色谱中选择流动相的一般原则：确保流动相与固定相的匹配。
三、改善色谱分离选择性的方法：如调整溶剂组成、使用添加剂等。
四、多元混合溶剂的多重选择性：通过合理搭配多元溶剂，实现更好的分离效果。
五、溶质保留值随溶剂极性变化的一般保留规律：帮助选择合适的流动相。
六、用线性溶剂化自由能关系（LSER）来表征反相液相色谱中溶质的保留值方程式：提供理论依据。
第四节 新型高效液相色谱的固定相和流动相
一、新型高效化学键合固定相：如杂化固定相、手性固定相等。
二、化学键合固定相分类方法简介：根据固定相的化学结构和性质进行分类。
三、整体色谱柱：提高色谱柱的效率和稳定性。
四、超热水流动相：提高分离效果和分析速度。
第五节 离子对色谱法
一、分离原理：基于溶质与对（反）离子之间的相互作用。
二、固定相、流动相和对（反）离子：选择合适的固定相、流动相和对（反）离子，以实现良好的分离效果。
三、影响离子对色谱分离选择性的因素：包括离子对的选择、浓度、比例等。
参考文献
第五章 梯度洗脱
第一节 基本原理
一、等度洗脱：流动相的组成和浓度保持不变。
二、梯度洗脱：流动相的组成和浓度随时间变化，以实现更好的分离效果。
第二节 影响梯度洗脱的各种因素
一、梯度洗脱时间（t_G）对分离的影响：梯度洗脱时间的长短直接影响分离效果。
二、强洗脱溶剂组分B浓度变化范围的影响：B组分的浓度变化范围影响梯度洗脱的效果。
三、梯度陡度对保留值的影响：梯度陡度的大小决定了溶质保留值的变化速率。
四、柱温变化对保留值的影响：柱温的变化直接影响溶质的保留值。
五、梯度洗脱程序曲线形状的影响：梯度洗脱程序曲线的形状决定了溶质分离的效果。
六、影响梯度洗脱的其他变量：如流动相的流速、色谱柱的直径等。
第三节 优化梯度洗脱的方法
一、建立梯度洗脱方法的一般步骤：包括确定梯度洗脱程序、选择合适的色谱柱等。
二、梯度洗脱中的实验条件：包括流动相的组成、浓度、流速等。
第四节 梯度洗脱的图示方法
一、二元溶剂梯度洗脱：通过图示展示二元溶剂的梯度变化。
二、三元溶剂梯度洗脱：通过图示展示三元溶剂的梯度变化。
三、四元溶剂梯度洗脱：通过图示展示四元溶剂的梯度变化。
四、用极坐标和球面坐标描述梯度洗脱：提供一种新的图示方法。
参考文献
高效液相色谱方法及应用的目录
答：一、按溶质在两相分离过程中的物理化学原理，高效液相色谱法可分为吸附色谱法、分配色谱法、离子交换色谱法和排阻色谱法等。二、按溶质在色谱柱洗脱的动力学过程，高效液相色谱法可分为正相色谱法和反相色谱法等。第三节 高效液相色谱法的应用范围和局限性 一、应用范围：广泛应用于药物分析、生物化学、...
HPLC简介
答：HPLC系采用高压输液泵将规定的流动相泵入装有填充剂的色谱柱,对供试品进行分离测定的色谱方法[2]。注入的供试品,由流动相带入柱内,各组分在柱内被分离,并依次进入检测器,由积分仪或数据处理系统记录和处理色谱信号。 2 对仪器的一般要求和色谱条件 HPLC所用的仪器为高效液相色谱仪。仪器应定期检定并符合有关...
色谱法的目录
答：第1章概论1.1色谱分析法的历史1.2色谱法的分类1.2.1按流动相和固定相的物态分类1.2.2按分离的原理分类1.2.3按固定相使用的方式分类1.2.4按色谱动力学过程分类1.2.5按色谱技术分类1.3色谱分析法的特点与局限性1.4色谱图和相关术语1.5色谱现代发展及相关联用技术1.6有关色谱的中文工具书...
高效液相色谱仪器使用方法
答：1、吹氦脱气法:利用氦气在液体中溶解度比空气低的特性,在0.1MPa压力下,以约60 mL/min流速通入流动相储液容器中10～15min,可以很有效地从流动相中排除溶解的空气,能排除接近80%的氧气。采用一个高效分布式喷射流装置,一体积的氦气可从流动相中将等体积的几乎全部气体排除。这意味着1L氦气通过1L流动相就可完成...
高效液相色谱常用什么色谱法
答：高效液相色谱法按分离机制的不同分为液固吸附色谱法、液液分配色谱法(正相与反相)、离子交换色谱法、离子对色谱法及分子排阻色谱法。1.液固色谱法 使用固体吸附剂,被分离组分在色谱柱上分离原理是根据固定相对组分吸附力大小不同而分离。分离过程是一个吸附-解吸附的平衡过程。常用的吸附剂为硅胶或氧化铝,粒度5~...
高效液相色谱有几种定量方法?其中那种是比较精确的定量方法?并简述?
答：色谱定量分析是根据组分检测响应讯号的大小，定量确定试样中各个组分的相对含量。其依据是：每个组分的量(重量或体积)与色谱检测器产生的检测响应值(峰高或峰面积)成正比。具体到特定方法，主要有下列方法：1.归一化法 当样品中所有组分能全部流出色谱柱，并在检测器上都能产生相应信号（得到色谱峰）时，...
高效液相色谱与经典液相色谱有何异同?
答：1、高效液相色谱法。由于高效液相色谱法具有高分辨率、高灵敏度、速度快、色谱柱可反复利用，流出组分易收集等优点，因而被广泛应用到生物化学、食品分析、医药研究、环境分析、无机分析等各种领域，并已成为解决生化分析问题最有前途的方法。2、经典液相色谱法。液相色谱是常温操作，不受样品挥发度和热稳定...
高效液相色谱法在药物分析中的应用
答：1. 在药物鉴别中的应用 高效液相色谱法（HPLC）利用保留时间这一定性参数，根据组分的结构和性质进行药物鉴别。中国药典广泛采纳此方法进行药物鉴别，如克拉霉素、利福平滴眼液、岗梅等7种冬青属中草药、南北五味子的鉴别。随着技术的进步，药典中不断引入新的鉴别方法，为药物鉴别提供了新思路。2. 在杂质...
反相高效液相色谱法是如何操作的?
答：反相高效液相色谱法（RP-HPLC）使用亲水性的固定相和疏水性的移动相，利用样品分子在移动相和固定相之间的互作用力差异进行分离。一、基本原理：1.疏水性固定相：反相色谱柱通常使用疏水性的固定相材料，如疏水链状碳氢化合物改性的硅胶或封闭的C18链，使分析物在移动相中具有亲水性，与固定相表面发生疏水...
高效液相色谱用于哪些物质的测定
答：总的来说，HPLC在分析各种化合物的组成、浓度、纯度和反应动力学等方面都具有广泛的应用价值。高效液相色谱（High Performance Liquid Chromatography，HPLC）是一种分离和分析化学物质的方法。它通过将待测混合物溶解在流动相（通常是一个溶剂）中，然后将其通过填充了固定相的柱子，利用不同成分在固定相中...
