提高高效液相色谱柱效的方法

作者&投稿:印俗 (若有异议请与网页底部的电邮联系)
提高液相色谱中柱效的有效途径有哪些~

提高液相色谱中柱效的有效途径有:减小填料粒径,增加色谱柱长,使用尽量大小均一、外型规则的填料,使用合适的流速,使用合适的流动相组成,使用合适的固定相。
高效液相色谱的工作方式:
在柱层析中,溶剂在重力作用下滴入装有吸附剂的色谱柱中。高效液相色谱是一种改进的柱色谱。在高达400个大气压的高压下,泵输送溶剂通过色谱柱。柱吸附剂或固定相通常是由固体颗粒(如二氧化硅或聚合物)制成的颗粒材料。
与柱色谱相比,利用泵输送,不仅可以快速分析,而且可以使用更小的颗粒作为柱填料。粒子越小,其表面积更大,通过固定相与流动相及样品组分之间的相互作用,可以更好地实现混合物中各组分分离。流动相通常是溶剂(如水、乙腈、甲醇)的混合物。
混合物的组分由于与吸收剂颗粒的相互作用的程度不同而彼此分离,在此过程中不同组分的洗脱速率不同,从而导致组分流出色谱柱时分离。与柱色谱相比,高效液相色谱自动化程度高,灵敏度高。

扩展资料:
液相色谱系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相)内,由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数;
在两相中作相对运动时,经过反复多次的吸附-解吸的分配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别,被分离成单个组分依次从柱内流出,通过检测器时,样品浓度被转换成电信号传送到记录仪,数据以图谱形式打印出来效液相色谱仪主要有进样系统、输液系统、分离系统、检测系统和数据处理系统。

提高液相色谱柱效的方法有:改进柱填料、改变色谱条件(温度和流速)等。
主要还是改进柱子本身的方法最为主要,不过这个色谱柱生产商考虑的肯定更多,我做QC的就不用管那么多了。
另外,如果柱效下降,保存之后换下来放置一段时间也可以恢复一部分柱效。

1、选用细颗粒的填料,可获得高柱效。

2、降低流动相流速,使得渗透时间变长,有利于达到高柱效。

3、流动相粘度低,溶质在流动相中的扩散系数大,有利于加快传质,可获得高柱效。

4、采用低配比固定液,有利于减小固定相传质阻力,可提高柱效。

5、提高温度,可减小流动相和固定相的粘度,增大组分的扩散系数,改善传质,提高柱效。

6、组分的扩散系数还取决于组分本身的结构,过大分子的扩散系数小,对获得高柱效不利。

扩展资料

高效液相色谱法有“四高一广”的特点:

①高压:流动相为液体,流经色谱柱时,受到的阻力较大,为了能迅速通过色谱柱,必须对载液加高压。

②高速:分析速度快、载液流速快,较经典液体色谱法速度快得多,通常分析一个样品在15~30分钟,有些样品甚至在5分钟内即可完成,一般小于1小时。

③高效:分离效能高。可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果,比工业精馏塔和气相色谱的分离效能高出许多倍。

④高灵敏度:紫外检测器可达0.01ng,进样量在μL数量级。

⑤应用范围广:百分之七十以上的有机化合物可用高效液相色谱分析,特别是高沸点、大分子、强极性、热稳定性差化合物的分离分析,显示出优势。

参考资料来源:百度百科-高效液相色谱







要提高液相色谱的效率可从以下几方面入手。
(1)降低移动相的流速,但会使分析时间延长。
(2)减少固定相的量,但色谱柱中样品的负载量也随之减小。
(3)减小固定相的颗粒度,但不能过分,过分后色谱柱的渗透率也会减小。
(4)选用低粘度的移动相,以利于快速传质,但却不利于多组份分析。
(5)适当提高柱温,可降低移动相的粘度,但柱效和分离度也随之降低。
(6)尽量减小停滞移动相的体积,但却加快了移动相的流速。 从以上介绍可看出,在色谱分析过程中,各种因素是互相联系和制约的只有通过对 柱效值的跟踪测算,对自己分析方法不断的研究和实践,才能找到最佳的工作条件。

要提高液相色谱的效率可从以下几方面入手。
  
  (1)降低移动相的流速,但会使分析时间延长。
  
  (2)减少固定相的量,但色谱柱中样品的负载量也随之减小。
  
  (3)减小固定相的颗粒度,但不能过分,过分后色谱柱的渗透率也会减小。
  
  (4)选用低粘度的移动相,以利于快速传质,但却不利于多组份分析。
  
  (5)适当提高柱温,可降低移动相的粘度,但柱效和分离度也随之降低。
  
  (6)尽量减小停滞移动相的体积,但却加快了移动相的流速。
  
  从以上介绍可看出,在色谱分析过程中,各种因素是互相联系和制约的。只有通过对
  
  柱效值的跟踪测算,对自己分析方法不断的研究和实践,才能找到最佳的工作条件。

柱效一般是色谱柱的固有属性吧,不明白如何提高柱效,如果只是要提高数值的话按计算公式可增长保留时间或提高峰型

是指把物质分离开吗?调整洗脱梯度和时间的设定。

高效液相色谱仪结构及原理
答:转载自分析测试百科网: “高效液相色谱仪结构及原理”高效液相色谱法是在经典色谱法的基础上,引用了气相色谱的理论,在技术上,流动相改为高压输送(最高输送压力可达4.9´107Pa);色谱柱是以特殊的方法用小粒径的填料填充而成,从而使柱效大大高于经典液相色谱(每米塔板数可达几万或几十万);...

高效液相色谱仪原理及操作步骤
答:参考资料:百度百科——高效液相色谱。 HPLC仪的工作原理是什么? 高效液相色谱法是在经典色谱法的基础上,引用了气相色谱的理论,在技术上,流动相改为高压输送(最高输送压力可达4.9´107Pa);色谱柱是以特殊的方法用小粒径的填料填充而成,从而使柱效大大高于经典液相色谱(每米塔板数可达几万或几十万);同时柱后连...

高效液相色谱法的原理
答:高效液相色谱是色谱法的一个重要分支,以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离后,进入检测器进行检测,从而实现对试样的分析。该方法已成为化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中重要的...

高效液相色谱原理是什么?
答:高效液相色谱是色谱法的一个重要分支,以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离后,进入检测器进行检测,从而实现对试样的分析。

高效液相色谱柱的一些要求
答:最常用的色谱柱填充剂为化学键合硅胶。反相色谱系统使用非极性填充剂,以十八烷基硅烷键合硅胶最为常用,辛基硅烷键合硅胶和其他类型的硅烷键合硅胶(如氰基键合硅烷和氨基键合硅烷等)也有使用。正相色谱系统使用极性填充剂,常用的填充剂有硅胶等。离子交换色谱系统使用离子交换填充剂;分子排阻色谱系统使用...

干货|最基础的高效液相色谱法知识!看完记得收藏!
答:以及紫外检测器的脱气和定期清洗。在长时间使用后,注意氘灯强度变化和噪音水平,建议在柱平衡稳定后进行分析,确保数据的准确性。最后,高效液相色谱的使用离不开对相关文献的参考,包括中国药典,以确保技术的最新和合规。让我们一起深入理解并熟练运用这一分析工具,提升实验的精确度和效率吧!

高效液相色谱常用什么色谱法
答:高效液相色谱法按分离机制的不同分为液固吸附色谱法、液液分配色谱法(正相与反相)、离子交换色谱法、离子对色谱法及分子排阻色谱法。1.液固色谱法 使用固体吸附剂,被分离组分在色谱柱上分离原理是根据固定相对组分吸附力大小不同而分离。分离过程是一个吸附-解吸附的平衡过程。常用的吸附剂为硅胶或氧化铝,粒度5~...

高效液相色谱(HPLC)系统适用性试验是指哪些内容?进行该试验的目的是什么...
答:一、在高效液相色谱法系统适用性试验中,有常用的四个内容:分离度、柱效、重复性和拖尾因子。1、分离度(resolution,R)——相邻两峰的保留时间之差与平均峰宽的比值。也叫分辨率,表示相邻两峰的分离程度。R≥1.5称为完全分离。2、柱效:色谱柱是色谱仪最重要的部件(心脏)。柱子内径一般为1~6...

高效液相色谱法有哪些特点
答:3、高效:分离效能高。可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果,比工业精馏塔和气相色谱的分离效能高出许多倍。4、高灵敏度:紫外检测器可达0.01ng,进样量在μL数量级。5、应用范围广:百分之七十以上的有机化合物可用高效液相色谱分析,特别是高沸点、大分子、强极性、热稳定性差化合物的分离分析...

高效液相色谱仪器的结构及其各部分作用是什么?
答:2、液相:高效液相色谱法是在经典色谱法的基础上,引用了气相色谱的理论,在技术上,流动相改为高压输送(最高输送压力可达4.9′107Pa);色谱柱是以特殊的方法用小粒径的填料填充而成,从而使柱效大大高于经典液相色谱(每米塔板数可达几万或几十万);同时柱后连有高灵敏度的检测器,可对流出物进行...