影响高效液相色谱分离度的主要因素
影响液相色谱仪分离度的因素有色谱柱填充性能、流动相和流速等。
1.色谱柱填充性能：
液相色谱柱的分离性能由固定相粒度、柱长和柱压降决定，这三个参数度也决定了样品组分的保留时间。保留时间不仅与色谱过程的热力学因素k有关，还与决定柱效和分离度的柱性能参数及流动相的粘度有关，这些参数都是影响色谱分离过程动力学的重要因素。
2.流动相：
液相色谱中，改变淋洗液组成和极性是改善分离的最直接因素，不可能通过增加柱温来改善传质。因此，液相色谱大多是恒温分析。流动相选择在液相色谱中显得特别重要，流动相可显著改变组分的分离状况。
3.流速：
流速大于0.5cm/s时，H－u曲线是一段斜率不大的直线。降低流速，柱效提高不是很大。但在实际操作中，流量仍是一个调整分离度和出峰时间的重要参数。
液相色谱仪：
液相色谱仪根据固定相是液体或是固体，又分为液－液（LLC）及液－固色谱（LSC）。现代液相色谱仪由高压输液泵、进样系统、温度控制系统、色谱柱、检测器、信号记录系统等部分组成。与经典液相柱色谱装置比较，具有高效、快速、灵敏等特点。
系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统，样品溶液经进样器进入流动相，被流动相载入色谱柱内。
由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数，在两相中作相对运动时，经过反复多次的吸附－解析的分配过程，各组分在移动速度上产生较大的差别，被分离成单个组分依次从柱内流出。
通过检测器时，样品浓度被转换成电信号传送到记录仪，数据以图谱形式打印出来高效液相色谱仪主要有进样系统、输液系统、分离系统、检测系统和数据处理系统。
高校液相色谱分离原理是什么?
答：答案补充 在同一色谱条件下，样品中K值大的组分在固定相中滞留时间长，后流出色谱柱；K值小的组分则滞留时间短，先流出色谱柱。混合物中各组分的分配系数相差越大，越容易分离，因此混合物中各组分的分配系数不同是色谱分离的前提。答案补充 在HPLC中，固定相确定后，K主要受流动相的性质影响。实践中...
反相高效液相色谱法的分离机理是什么?
答：3.静电作用：某些分析物分子具有带电性质，会在反相色谱中表现出与极性相关的分离行为。正负离子交换和电荷转移等作用机制会影响分析物在固相和流动相之间的平衡位置，从而实现分离。三、应用：反相高效液相色谱法广泛用于药物分析、环境监测、食品安全、生化分析等领域。由于其分离效果优良、灵敏度高、选择性...
高效液相色谱仪的分离度为什么要大于1.5
答：相邻两峰的保留时间之差与平均峰宽的比值.也叫分辨率,表示相邻两峰的分离程度.R越大,表明相邻两组分分离越好.1、一般说当R＜1时,两峰有部分重叠；当R=1.0时,分离度可达98 2、当R=1.5时,称为6σ分离,裸露峰面积为99.7%.R≥1.5称为完全分离.《中国药典》规定R应大于1.5.通常用R=1.5...
高效液相色谱法分离某物质得到的色谱图两个峰值相同,是什么原因?应该采 ...
答：从简单到复杂，可行性从高到低的方法如下 1：换方法，通过检索相关文献找到更合适的分析方法。2：换柱子，更换性能更好的色谱柱以改善分离度【旧柱子换成新柱子，短柱子换成长柱子，用高效分离柱（粒径更小，孔径更细的柱子）或者根据两个化合物的性质换特殊柱子（例如换含碳量更高或更低的柱子或者...
高效液相色谱的原理及分析方法?
答：当试样进入色谱柱,溶质在两相间进行分配。达到平衡时,服从于高效液相色谱计算公式: 高效液相色谱计算公式式中,cs—溶质在固定相中浓度;cm--溶质在流动相中的浓度; Vs—固定相的体积;Vm—流动相的体积。LLPC与GPC有相似之处,即分离的顺序取决于K,K大的组分保留值大;但也有不同之处,GPC中,流动相对K影响不大...
高效液相色谱仪柱温箱温度一般设置多少度
答：能准确、稳定地控制液相色谱柱的稳定性。有利于提高液相色谱柱的灵敏度，提高光谱峰的分辨率，加快分离速度，缩短分析时间，保证分析结果。准确度和再现性。对于高效液相色谱仪而言，柱温的升高可以加快分离过程，但样品的不稳定保留时间会增加检测的难度，分辨率也会降低。
高效液相色谱分析法的原理是什么?
答：废液流入废液瓶。遇到复杂的混合物分离（极性范围比较宽）还可用梯度控制器作梯度洗脱。这和气相色谱的程序升温类似，不同的是气相色谱改变温度，而HPLC改变的是流动相极性，使样品各组分在最佳条件下得以分离。（二）高效液相色谱的分离过程：同其他色谱过程一样，HPLC也是溶质在固定相和流动相之间进行的一...
高效液相色谱法有哪些特点
答：3、高效：分离效能高。可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果，比工业精馏塔和气相色谱的分离效能高出许多倍。4、高灵敏度：紫外检测器可达0.01ng，进样量在μL数量级。5、应用范围广：百分之七十以上的有机化合物可用高效液相色谱分析，特别是高沸点、大分子、强极性、热稳定性差化合物的分离分析...
气相色谱分析中,影响分离度的因素有哪些?
答：气相色谱分析中，影响分离度的因素有：柱长、固定液性质 、柱的死体积。气相色谱分析是使混合物中各组分在两相间进行分配，其中一相是不动的（固定相）,另一相（流动相）携带混合物流过此固定相，与固定相发生作用，在同一推动力下，不同组分在固定相中滞留的时间不同，依次从固定相中流出，又称色...
为什么高效液相色谱仪的流动相在使用前必须过滤,脱气
答：用于高效液相色谱的流动相必须事先除气，否则容易在系统中逸出气泡，影响泵的工作。气泡还会影响色谱柱的分离效率、检测器的灵敏度、基线的稳定性，甚至使其无法检测。噪音增加，基线不稳定，突然跳跃。此外，溶解在流动相中的氧可以与样品、流动相甚至固定相（如烷基胺）发生反应。溶解气体也会引起溶剂ph值...
