高效液相色谱仪与气相色谱仪有什么异同?

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高效液相色谱仪与气相色谱仪有什么异同~

液相色谱仪和气相色谱仪都是采用色谱法分析,但是他们实际上还是有所不同的,主要体现在以下几个方面:
一、概念不同
1.气相色谱仪:
气相色谱是一种物理的分离方法。利用被测物质各组分在不同两相间分配系数(溶解度)的微小差异,当两相作相对运动时,这些物质在两相间进行反复多次的分配使原来只有微小的性质差异产生很大的效果而使不同组分得到分离。
2.液相色谱仪:
高效液相色谱法是在经典色谱法的基础上引用了气相色谱的理论。在技术上,流动相改为高压输送;色谱柱是以特殊的方法用小粒径的填料填充而成,从而使柱效大大高于经典液相色谱(每米塔板数可达几万或几十万);同时,柱后连有高灵敏度的检测器可对流出物进行连续检测。
二、应用范围不同
1.气相色谱仪:
分离能力好、灵敏度高、分析速度快、操作方便等。
受技术条件的限制,沸点太高的物质或热稳定性差的物质都难于应用气相色谱法进行分析,一般对500℃以下不易挥发或受热易分解的物质部分可采用衍生化法或裂解法。
2.液相色谱仪:
高效液相色谱法,只要求试样能制成溶液,而不需要气化,因此,不受试样挥发性的限制。对于高沸点、热稳定性差、相对分子量大(大于400以上)的有机物(些物质几乎占有机物总数的75%-80%)原则上都可应用高效液相色谱法来进行分离、分析。据统计,在已知化合物中能用气相色谱分析的约占20%,而能用液相色谱分析的约占70-80%。
三、仪器构造不同
气相色谱仪
由载气源、进样部分、色谱柱、柱温箱、检测器和数据处理系统组成。进样部分、色谱柱和检测器的温度均在控制状态。
1.柱箱:
色谱柱是气相色谱仪的心脏,样品中的各个组分在色谱柱中经过反复多次分配后得到分离,从而达到分析的目的,柱箱的作用就是安装色谱柱。由于色谱柱的两端分别连接进样器和检测器,因此,进样器和检测器的下端(接头)均插入柱箱。柱箱能够安装各种填充柱和毛细管柱,并且操作方便。色谱柱(样品)需要在一定的温度条件下工作,因此,采用微机对柱箱进行温度控制。并且由于设计合理,柱箱内的梯度很小。
对于一些成分复杂、沸程较宽的样品,柱箱还可进行三阶程序升温控制。且程序设定后自动运行无需人工干预,降温时还能自动后开门排热。
2.进样器:
进样器的作用是将样品送入色谱柱。如果是液体样品,进样器还必须将其汽化。因此,采用微机对进样器进行温度控制。
根据不同种类的色谱柱及不同的进样方式,共有五种进样器可供选择:填充柱进样器;毛细管不分流进样器附件;毛细管分流进样器附件;毛细管分流/不分流进样器;六通阀气体进样器。
3.检测器:
检测器的作用是将样品的化学信号转化为物理信号(电信号)。
检测器也需要在一定的温度条件下才能正常工作,因此,采用微机对检测器进行温度控制。
根据各种样品的化学物理特性,共有五种检测器可供选择:氢火焰离子化检测器(FID);热导检测器(TCD);电子捕获检测器(ECD);氮磷检测器(NPD);火焰光度检测器(FPD)
4.数据处理系统:
该系统可对测试数据进行采集、贮存、显示、打印和处理等操作,使样品的分离、制备或鉴定工作能正确开展。
液相色谱仪:
高效液相色谱仪主要有进样系统、输液系统、分离系统、检测系统和数据处理系统组成。
1.进样系统
一般采用隔膜注射进样器或高压进样间完成进样操作,进样量是恒定的。
这对提高分析样品的重复性是有益的。
2.输液系统
该系统包括高压泵、流动相贮存器和梯度仪三部分。高压泵的一般压强为l.47-4.4X107Pa流速可调且稳定,当高压流动相通过层析柱时,可降低样品在柱中的扩散效应,可加快其在柱中的移动速度,这对提高分辨率、回收样品、保持样品的生物活性等都是有利的。流动相贮存错和梯度仪,可使流动相随固定相和样品的性质而改变,包括改变洗脱液的极性、离子强度、pH值或改用
3.分离系统
该系统包括:色谱柱、连接管和恒温器等。
色谱柱一般长度为10-50cm(需要两根连用时,可在二者之间加一连接管)内径为2-5mm,由优质不锈钢或厚壁玻璃管或钛合金等材料制成,柱内装有直径为5-10μm粒度的固定相(由基质和固定液构成),固定相中的基质是由机械强度高的树脂或硅胶构成,它们都有惰性(如,硅胶表面的硅酸基因基本已除去)、多孔性和比表面积大的特点,加之其表面经过机械涂渍(与气相色谱中固定相的制备一样)或者用化学法偶联各种基因(如磷酸基、季胺基、羟甲基、苯基、氨基或各种长度碳链的烷基等)或配体的有机化合物。
因此,这类固定相对结构不同的物质有良好的选择性,例如,在多孔性硅胶表面偶联豌豆凝集素(PSA)后,就可以把成纤维细胞中的一种糖蛋白分离出来。
另外,固定相基质粒小,柱床极易达到均匀、致密状态,极易降低涡流扩散效应。基质粒度小、微孔浅,样品在微孔区内传质短。这些对缩小谱带宽度、提高分辨率是有益的。根据柱效理论分析,基质粒度小,塔板理论数N就越大。
这也进一步证明基质粒度小,会提高分辨率的道理。再者,高效液相色谱的恒温器可使温度从室温调到60℃通过改善传质速度,缩短分析时间,就可增加层析柱的效率。
4.检测系统
高效液相色谱常用的检测器有紫外检测器、示差折光检测器和荧光检测器三种:
(1)紫外检测器
该检测器适用于对紫外光(或可见光)有吸收性能样品的检测。
其特点:使用面广(如,蛋白质、核酸、氨基酸、核苷酸、多肽、激素等均可使用);灵敏度高(检测下限为10-10g/mL);线性范围宽;对温度和流速变化不敏感;可检测梯度溶液洗脱的样品。
(2)示差折光检测器
凡具有与流动相折光率不同的样品组分,均可使用示差折光检测器检测。糖类化合物的检测使用此检测系统。这一系统通用性强、操作简单,但灵敏度低(检测下限为10-7g/mL)流动相的变化会引起折光率的变化。因此,它既不适用于痕量分析,也不适用于梯度洗脱样品的检测。
(3)荧光检测器
凡具有荧光的物质,在一定条件下,其发射光的荧光强度与物质的浓度成正比。因此,这一检测器只适用于具有荧光的有机化合物(如多环芳烃、氨基酸、胺类、维生素和某些蛋白质等)的测定,其灵敏度很高(检测下限为10-12至10-14g/mL)痕量分析和梯度洗脱作品的检测均可采用。
5.数据处理系统
该系统可对测试数据进行采集、贮存、显示、打印和处理等操作,使样品的分离、制备或鉴定工作能正确开展。

一、流动相不同
液相是液体的,液相多了一个泵用来运转。气相的流动相是载气,是气体。一般情况下,液相色谱中固定相多为固体,流动相多为液体;而气相色谱中载气多为惰性气体(N2、Ar等),从适用范围来看:
液相色谱适用最广,可用于化学分析、食品分析、环境分析、药物分析、中草药图谱分析等等,根据目标分析物极性大小不同,出峰时间也就不同;而气相色谱的分析物多为气体或易挥发的物质,从分析物的角度来看,液相色谱应用更广。
二、应用范围不同
气相色谱法:分离能力好、灵敏度高、分析速度快、操作方便等。受技术条件的限制,沸点太高的物质或热稳定性差的物质都难于应用气相色谱法进行分析,一般对500℃以下不易挥发或受热易分解的物质部分可采用衍生化法或裂解法。
三、仪器构造不同
1、气相色谱仪由载气源、进样部分、色谱柱、柱温箱、检测器和数据处理系统组成。进样部分、色谱柱和检测器的温度均在控制状态。
2、高效液相色谱仪主要有:进样系统、输液系统、分离系统、检测系统和数据处理系统组成。

扩展资料:
高效液相色谱还有色谱柱可反复使用、样品不被破坏、易回收等优点,但也有缺点,与气相色谱相比各有所长,相互补充。高效液相色谱的缺点是有“柱外效应”。
在从进样到检测器之间,除了柱子以外的任何死空间(进样器、柱接头、连接管和检测池等)中,如果流动相的流型有变化,被分离物质的任何扩散和滞留都会显著地导致色谱峰的加宽,柱效率降低。高效液相色谱检测器的灵敏度不及气相色谱。
参考资料来源:百度百科-高效液相色谱法

1.分析对象的区别
GC:适于能气化、热稳定性好、且沸点较低的样品;但对高沸点、挥发性差、 热稳定性差、离子型及高聚物的样 品,尤其对大多数生化样品不可检测占有机物的20% HPLC:适于溶解后能制成溶液的样品(包括有机介质溶液),不受样品挥发性和热稳定性的限制,对分子量大、难气化、热稳定性差的生化样品及高分 子和离子型样品均可检测用途广泛,占有机物的80%
2.流动相差别的区别
GC:流动相为惰性,气体组分与流动相无亲合作用力,只与固定相有相互作用。 HPLC:流动相为液体,流动相与组分间有亲合作用 力,能提高柱的选择性、改善分离度,对分离起正向作用。且流动相种类较多,选择余地广,改 变流动相极性和pH值也对分离起到调控作用,当 选用不同比例的两种或两种以上液体作为流动相也可以增大分离选择性。



液相色谱仪是在经典液相柱色谱仪的基础上,引入了气相色谱仪的理论,技术上采用了高压输液泵、固定相、梯度洗脱技术和高灵敏度检测器,具有高压、高速、、高灵敏度、高选择性和应用范围广等特点。

  一、液相色谱仪与气相色谱仪的相同点: 兼具分离和分析功能,均可在线检测。

  二、液相色谱仪与气相色谱仪的主要差别:

  1、分析对象差别:

  (1)气相色谱仪的分析对象:

  1)能气化、热稳定性好和沸点较低的样品。

  2)高沸点、挥发性差、热稳定性差、离子型及高聚物样品不能检测。

  3)仅占有机物的15%~20%左右。

  (2)液相色谱仪的分析对象:

  1)溶解后能制成溶液的样品。

  2)不受样品挥发性和热稳定性的限制。

  3)分子量大、难气化、热稳定性差、高分子和离子型样品均可检测。

  4)应用广泛,占有机物的80%~85%左右。

  2、流动相差别:

  (1)气相色谱仪的流动相:

  1)流动相为惰性气体。

  2)组分与流动相之间无亲合作用力,只与固定相作用。

  (2)液相色谱仪的流动相:

  1)流动相为液体。

  2)流动相与组分之间有亲合作用力,为提高柱的选择性和改善分离度增加了因素,对分离起很大作用。

  3)流动相种类较多,选择余地大。

  4)流动相极性和PH值的选择对分离起到重要作用。

  5)选用不同比例的两种或两种以上液体作为流动相可以增大分离选择性。

  3、操作条件差别:

  (1)气相色谱仪的操作条件: 加温操作。

  (2)液相色谱仪的操作条件: 室温,高压(液体粘度大)。

高效液相色谱法与气相色谱法的有哪些异同点
答:三、仪器构造不同 1、气相色谱仪由载气源、进样部分、色谱柱、柱温箱、检测器和数据处理系统组成。进样部分、色谱柱和检测器的温度均在控制状态。2、高效液相色谱仪主要有:进样系统、输液系统、分离系统、检测系统和数据...

高效液相色谱和气相色谱的异同点急用
答:不同点:一、流动相不同:hplc为液体流动相,gc为永久性气体作流动相(通常叫做载气)二、进样器不同:高效液相为平头进样针,气相色谱为尖头进样针 三、色谱柱长不同:(1)气相色谱柱通常几米到几十米 (气相色谱...

气相色谱和液相色谱仪在仪器构造、分离原理、应用范围上有什么区别?
答:\x0d\x0a 2.液相:高效液相色谱法是在经典色谱法的基础上,引用了气相色谱的理论,在技术上,流动相改为高压输送(最高输送压力可达4.9′107Pa);色谱柱是以特殊的方法用小粒径的填料填充而成,从而使柱效大大高于经典液相色谱(每米塔...

高效液相色谱分析法和气相色谱法的区别
答:高效液相色谱分析法(HPLC),它的基本概念及理论基础(如保留值、塔板理论、速率理论、容量因子、分离度等),与气相色谱是一致的,但又有不同之处。高效液相色谱与气相 色谱的主要区别可归结于以下几点:(1)进样方式的不...

气相色谱仪和液相色谱仪区别
答:气相色谱仪(GC)和液相色谱仪(LC)都是用来检测有机物含量的常见分析仪器。气相色谱仪使用气体作为载气将样品中的化合物分离,然后通过探测器检测每个化合物的浓度。它常用于分析挥发性有机化合物、气体和低沸点的小分子有...

气相色谱和液相色谱仪分别是由哪几部分组成的
答:气相色谱法是采用惰性气体(或称载气)作为流动相的色谱方法。色谱过程是通过气相色谱仪来完成的。气相色谱仪一般有5个基本部分组成:1 气路系统 包括载气、燃烧气、助燃气、气体净化器流速控制和测量器 2 进样系统 ...

气相色谱和液相色谱仪在仪器构造、分离原理、应用范围上有什么区别?
答:二、液相色谱仪与气相色谱仪的主要差别:1、分析对象差别:(1)气相色谱仪的分析对象:1)能气化、热稳定性好和沸点较低的样品。2)高沸点、挥发性差、热稳定性差、离子型及高聚物样品不能检测。3)仅占有机物的15%~20%...

气相色谱仪和液相色谱仪区别
答:气相色谱仪和液相色谱仪的主要区别在于它们的应用场景,以及分离物质的原理不同,气相色谱仪是通过将样品放入离子化坩埚中,将混合物离子化为带有正负电荷的离子,然后将其运行在电场中,由于不同离子散射率的不同,混合物分离出来。 气相色谱...

气相色谱仪和液相色谱仪的区别
答:一般来说 气相检测破坏样品 液相检测很少破坏样品 样品在气相中不纯在二次分配 样品在液相中分别在流动相 固定相中存在二次分配 六、用途不同:气相色谱仪主要是分析具有一定挥发性的物质,液相色谱仪可以分析一般的有机化合...

气相与液相色谱区别
答:气相色谱法系采用气体为流动相(载气)流经装有填充剂的色谱柱进行分离测定的色谱方法。物质或其衍生物气化后,被载气带入色谱柱进行分离,各组分先后进入检测器,用记录仪、积分仪或数据处理系统记录色谱信号。高效液相色谱法...