怎样操作液相色谱仪具体点

作者&投稿:革查 (若有异议请与网页底部的电邮联系)
如何操作高效液相色谱仪~

目的:制定规范的高效液相色谱仪操作、维护保养和清洁规程。
范围:适用于Agilent 1260 HPLC。
责任:色谱检验工程师负责本规程执行。
内容:
1 开机
1.1 打开电脑。
1.2 打开液相色谱各个模块的电源。
1.3 双击桌面“仪器—联机”,进入联机界面。
1.4 排气:
1.4.1 手动旋开泵处冲洗阀(逆时针旋转约1圈)。
1.4.2 右键单击“泵”图标区域,选择“方法…”选项,进入泵编辑画面,设流速:5ml/min(一般为3-5ml/min),点击“确定”。
1.4.3 右键单击“泵” 图标,点击“控制…”选项,选中“ON”,点击“确定”,则系统开始冲洗,直到管线内(由溶剂瓶到泵入口)无气泡为止,(一般为5分钟),切换通道继续冲洗,直到所有要用通道无气泡为止。
1.4.4 右键单击“泵” 图标,点击“方法…”选项,设流速:0ml/min,手动旋紧冲洗阀。
1.4.5 右键单击“泵”图标,点击“方法…”选项,按照方法要求选择合适比例的流动相,设流速:1.0ml/min。
1.4.6 同理右键单击“柱温箱”,“检测器”图标,点击“方法…”选项,按照方法的要求设置温度,波长,点击“控制” 选项,“ON”打开柱温箱和检测器。

2 编辑方法
2.1 点击“方法”-“编辑完整方法”开始编辑完整方法。
2.2 选中除“数据分析 ”外的三项,进入下一选项卡。
2.3 方法信息:在“方法注释”中加入方法的信息(如:This is for test!)。进入下一选项卡。
2.4 泵参数设定:在“流速”处输入流量, 如1.0ml/min,停止时间:如10 min(该停止时间仅为做一个样品需要的时间),按照要求选择合适比例的流动相配比,如乙腈:水=75:25,A为水,B为乙腈,则设置B:75%即可。进入下一选项卡。
2.5 自动进样器参数设定: 选择“洗针进样”----可以输入进样体积和洗瓶位置,进入下一选项卡。
2.6 柱温箱参数设定: 在“温度”下面的空白方框内输入所需温度,如:40度。进入下一选项卡。
2.7 UV检测器参数设定: 在“波长”下方的空白处输入所需的检测波长,如254nm。点击确定。
2.8 在“ 运行时选项表 ”中,选中“ 数据采集”,点击“确定”。
2.9 从“方法”菜单,选中“方法另存为…”,输入一方法名,如“测试”,点击“确定。

3 单次采集
3.1 从“运行控制”菜单中,选择“样品信息”选项,选择合适的路径,在“数据文件”中选择 “前缀/计数器”,输入样品瓶的位置,点击“确定”。
3.2基线平稳后约10分钟,从“运行控制”菜单中选择“运行方法”。

4 多次数据采集
4.1 按照步骤2 编辑完整方法。
4.2 点击“序列”-“序列表”,输入“样品瓶”“样品名称”,“进样次数”,选择合适的“做样方法”
4.3 点击“序列”-“序列参数”,选择序列数据的保存路径(序列会自动生成以“序列名称-时间”为名称的文件夹保存数据),数据建议以选择 “前缀/计数器”保存。
4.4 从“序列”菜单,选中“序列另存为…”,输入一序列名,如“测试”,点击“确定。
4.5 从“运行控制”菜单中选择“运行序列”。

5 数据分析(脱机状态使用)
5.1 双击“仪器 —脱机”图标 进入的脱机画面。
5.2 从“视图”菜单中,点击“数据分析”进入数据分析画面。
5.3 从“文件”菜单选择“调用信号”,选中您的数据文件名。点击“ 确定”,则数据被调出。(如预建立标准曲线,应先打开浓度较低的标样图谱。)
5.4 做谱图优化:从“图形”菜单中选择“信号选项”。从“范围” 中选择“满量程” 或“自动量程” 及合适的时间范围或选择“自定义量程” 调整。反复进行,直到图的比例合适为止。点击“ 确定”。

6 积分:
6.1 从“积分”菜单中选择“积分事件”选项,选择合适的“斜率灵敏度”,“峰宽”,“最小峰面积”,“最小峰高”。点击 ,自动加载积分参数。
6.2 点击左边“√”图标,将积分参数存入方法并退出“积分事件”。
6.3 如积分结果不理想,则修改相应的积分参数,直到满意为止。

7 标准曲线
7.1 点击“校正”-“校正设置”,输入“含量单位”。
7.2 点击“校正”-“新建校正表”,点击确定。输入“化合物名称”和“含量”,点击“确定”,按照提示删除其他组分。
7.3 至此完成单级校正,如要增加校正级别,应从“文件”菜单选择“调用信号”,选中您的数据文件名(第二个标样),点击“校正”-“添加级别”,点击确定,输入“含量”,依次增加校正级别。

8 打印报告
8.1 从“报告”菜单中选择“设定报告”选项,点击“定量结果”框中“定量”右侧的黑三角,选中“外标法”,其它选项不变,点击“ 确定”。
8.2 从“报告”菜单中选择“打印报告”,则报告结果将打印到屏幕上,如想输出到打印机上,则点击“报告” 底部的“打印”钮。
8.3 点击“文件”-“另存为”-“方法”,把数据分析方法保存,下次分析可直接在“文件”-“调用”-“方法”下,将该方法调出使用。(调用的方法中含有积分方法,标准曲线方法和打印报告方法)

9 关机
9.1 关机前,先关紫外灯,用相应的溶剂(甲醇或乙腈)充分冲洗系统大约30分钟。(色谱柱最终应保存在甲醇或乙腈中)
9.2 退出化学工作站,依提示关泵,及其它窗口,关闭计算机。
9.3关闭Agilent 1260各模块电源开关。

10 其它注意事项
10.1当样品运行时,切勿打开自动进样器前遮盖,否则进样过程停止。
10.2系统发生漏液时,机器会检测到并停止进样,状态指示灯为红色。检查擦干并安置好漏液处,擦干漏液传感器,单击ON按钮,系统重新初始化。
10.3注意紫外灯使用寿命,切勿来回开关紫外灯。

1、开机设定参数(检测波长、流速),更换所需流动相,检查色谱柱是否正确。
2、排液置换管路中流动相,冲洗进样阀,洗好进样针。
3、冲洗色谱柱进行平衡,其间可提前进行样品的处理,样品信息的注册。
4、平衡好以后进空白试验,排除系统污染。
5、柱子稳定好以后进样,等待运行结束(其间清洗进样针),积分计算,出具报告。

一般程序为,开机——冲洗系统——连接色谱柱——冲洗和平衡色谱柱——编制或调用色谱方法——进标准品——进样品——对色谱图积分——计算结果(打印报告)
没有色谱仪的具体品牌型号,没法更详细了

液相色谱仪使用步骤是什么?
答:1. 色谱柱准备 色谱柱是液相色谱中的核心部分,通常由内壁抛光的不锈钢管构成,内径约为4-5毫米,长度在100至250毫米之间。在使用前,需要按照气相色谱法清洗空柱,并通过匀浆法装填固定相。将色谱柱安装到仪器管路中,使用柱式机械往复泵输送脱气的流动相。在基线稳定后,可以使用苯、萘、菲等混合试液...

液相色谱仪的使用步骤是什么?
答:1. 开机 1.1 开启电脑。1.2 开启液相色谱仪各模块的电源。1.3 双击桌面上的“仪器—联机”图标,进入联机界面。1.4 排气 1.4.1 手动开启泵处的冲洗阀(逆时针旋转约1圈)。1.4.2 右键单击“泵”图标,选择“方法?”选项,进入泵编辑画面,设置流速为5ml/min(通常为配比3-5ml/min),...

液相色谱,质谱联用仪的使用方法是什么?
答:一、开、关机顺序:开机:通氮气→开电源→设置温度(柱箱、汽化)→加热→通空气、氢气→点火→调准基线→进样 关机:关氢气、空气→关掉加热器→通者氮气降温至室温→关电源→关氮气 二、温度设定 1、柱温设定(范围:-99℃~399℃)例如:设置温度为50℃,命令如下COL/AUX.1 I.TEMP 50...

液相色谱仪使用步骤是什么?
答:1. 色谱柱的使用和维护 色谱柱是液相色谱仪的核心部分,由空柱和填料组成。在使用前,需将空柱洗净并填充固定相。为防止柱污染,通常会使用一个预柱来保护主柱。反相键合相柱需要特别注意再生过程,必须先用流动相冲洗,然后用甲醇进行清洗和再生。2. 流动相的洗脱方式 流动相的洗脱方式包括恒溶剂脱洗...

怎样操作液相色谱仪具体点
答:1. 在开启液相色谱仪之前,设置好检测波长和流速等参数,并更换所需的流动相。同时,检查色谱柱是否安装正确。2. 排空管路中的旧流动相,并置换为新的流动相。冲洗进样阀,并清洁进样针。3. 冲洗色谱柱以达到平衡状态。在平衡过程中,可以预先处理样品并注册样品信息。4. 色谱柱平衡完成后,进行空白...

液相色谱仪的使用步骤口诀
答:液相色谱仪使用,遵循口诀操作,条理清晰很重要。第一步,开启机器,滤液准备,超声脱气。流动相过滤,去除杂质,保护色谱柱。有机相滤膜,专一过滤,脱气过程,排除气体。机器开启后,流动相置位,泵启排气,检测器随后开。排气完成,关闭阀门,有机相冲洗,柱子清洁。水相随后跟上,流速控制,基线稳定。...

高效液相色谱仪的基本操作
答:一、实验准备阶段 需要配置好实用所需的流动相,要注意所使用的流动相不能对实验或设备造成影响或损害(比如堵塞或腐蚀)。准备好流动相之后,需要对仪器及色谱柱进行冲洗和平衡,确保仪器压力正常,基线稳定。样品填写需要经过必要的净化处理,过0.45um以下微孔滤膜确保样品是澄清溶液,并装入合适的液相色...

液相气相色谱的操作步骤
答:四、待分析的样品必须彻底溶解澄清、过滤,以避免堵塞、损坏色谱柱;五、分析完成后,须注意及时清洗色谱柱和检测器的比色池。以具体仪器的举例:岛津LC-10AD型高效液相色谱仪操作规程 1.目的 规范岛津LC-10AD型高效液相色谱仪的使用。2.范围 适用于岛津LC-10AD型高效液相色谱仪的使用。3.职责 质...

液相色谱仪的使用方法
答:液相色谱仪使用及维护 液相色谱仪使用时要非常的注意。使用卡套柱时,两端的卡套应时刻连接在柱芯上。不管您是平衡色谱柱或是清洗,任何时候都不能将卡套取下来,否则会造成填料的流失。液相色谱柱使用注意:卡套柱的安装(加预柱)1.将卡套架套入柱芯 2.将两片夹套片嵌入柱芯的凹槽,使夹套高于柱...

液相色谱仪使用步骤是什么?
答:2.3 针对异常色谱峰问题[2-4]异常的色谱峰指的是色谱图中无峰或出现负峰、宽峰、双峰、肩峰、峰形不对称等情况。具体情况与原因分析如表3。3 高效液相色谱仪的保养[5-7]3.1 HPLC的日常操作条件 工作温度10~30℃; 相对湿度<80%; 最好是恒温、恒湿,远离高电干扰、高振动设备。3.2 泵的...