HPLC法中定量分析方法大致有哪几种？
原题:
[药物分析]HPLC或GC法测定药物含量时常用内标法定量，其校正因子(F)值的计算公式为
选项:
A.F=A标／A内×C标／C内
B.F=A标／A标×C内／C内
C.F=A内／A标×C标／C内
D.F=A内／A标×C内／C标
E.F=A内／A内×C标／C标
答案：
C
首先看是否用的药典推荐的色谱柱，请尽量使用；如果已经是了，看是否柱效已经变低，是否可购买新柱。
如果排除柱子的问题，可以适当减少有机相的比例（如减少5%），柱温也可微调一下。当然这已经改变了药典方法，如果客户不允许的话还是要从色谱柱上解决了。
气相色谱定量检测一般就两种，一个是外标法，一个是标法，对于没有标准物质的，就只能靠容面积归一法粗略定量。
通过对人类和环境有影响的各种物质的含量、排放量的检测，跟踪环境质量的变化，确定环境质量水平，为环境管理、污染治理等工作提供基础和保证。简单地说，了解环境水平，进行环境监测，是开展一切环境工作的前提。
扩展资料：
HPLC根据固定相和流动相的成分分为正相色谱和反向色谱。
正相色谱法
采用极性固定相（如聚乙二醇、氨基与腈基键合相）；流动相为相对非极性的疏水性溶剂（烷烃类如正已烷、环已烷），常加入乙醇、异丙醇、四氢呋喃、三氯甲烷等以调节组分的保留时间。常用于分离中等极性和极性较强的化合物（如酚类、胺类、羰基类及氨基酸类等）。
高效液相色谱以经典的液相色谱为基础，是以高压下的液体为流动相的色谱过程。通常所说的柱层析、薄层层析或纸层析就是经典的液相色谱。所用的固定相为大于100um 的吸附剂（ 硅胶、氧化铝等）。这种传统的液相色谱所用的固定相粒度大，传质扩散慢，因而柱效低，分离能力差，只能进行简单混合物的分离。而高效液相所用的固定相粒度小（5um-10um）、传质快、柱效高。
高效液相色谱法（HPLC）是20世纪60年代后期发展起来的一种分析方法。近年来，在保健食品功效成分、营养强化剂、维生素类、蛋白质的分离测定等应用广泛。世界上约有80%的有机化合物可以用HPLC来分析测定。
类型：
吸附色谱
在吸附色谱中，样品的极性官能团牢固地保留在填料的吸附活性中心上，非极性烃基几乎不予保留。所以，要清楚地辨别极性功能团的种类、数量和位置。通常，样品能用吸附色谱分离的应是能溶解于有机溶剂并是非离子型的，强离子样品是不适宜的。
吸附色谱所使用的流动相以正己烷、三氯甲烷、二氯甲烷作为基础，按照样品的极性加上乙醇，然而，最好是使所加入醇的浓度为10%或更少一些。如有可能，可进一步减小百分数。因为高浓度的醇会减少填料的吸附活性，减弱吸附能力，并使重现困难。
分配色谱
1.正相分配色谱
正相分配色谱适用于不溶于水而溶于有机溶剂且带有极性基团的样品，但正相分配色谱不适合于离子型物质。
2.反相分配色谱
这种方法应用非常广泛，应用的范围也很广，在反相分配色谱中，样品的非极性部分起保留作用。
通过使用的流动相是水—甲醇和水—乙腈，通过加入甲醇或乙腈的量的不同来调节分离，但如果样品带有离子型基团，需要在流动相中加入盐或调节流动相的PH值，例如，如果样品有一个—COOH 基团，使流动相的PH值是偏向酸性的，由于抑制了—COOH基团的电离而加强了保留。这个方法叫离子抑止法，如果样品有强离子基，有时候采用在流动相中加入适当抗衡离子以形成离子对的离子对法。
在调节PH值中，保持PH值在填料说明书手册中所规定的范围内，大多数化学键式的二氧化硅使用在PH=2-9，然而，当加入盐以后，最好使其PH=7.5-8或更小的，多孔聚合物填料能应用非常广泛的PH值。
离子交换色谱
这个方法是用填料的固定相的离子交换基团和样品的离子基团之间的离子交换来分离样品组分的，按照所交换的离子分成阳离子交换和阴离子交换。
离子交换色谱使用于能溶于水的离子型物质。在离子交换色谱中，流动相的盐的浓度、PH及盐的种类等都对保留值有很大的影响。在高效液相色谱的离子交换中所用的盐有磷酸盐、醋酸盐和硼酸盐。因为氯化物会腐蚀不锈钢仪器，在高效液相色谱中不能使用NaCl或其他的氯化物盐类。根据测量波长有些盐也不能使用，例如，醋酸吸收大约在210nm，当检测处在短波端的时候，用醋酸作流动相是不合适的。
凝胶色谱
凝胶色谱不同于以上三种分离方法。凝胶色谱是根据分子大小用分子筛效应来分离样品组分的。这个方法也叫排阻色谱或粒度排阻色谱。具有一定孔径的多孔性合成聚合物经常用作填料。
因为在样品中，小尺寸的分子深深地渗透到微孔中，所以迟流出，而大尺寸的分子没有渗透到微孔中，就很快流出。通常合成树脂的分离使用有机溶剂作流动相，叫做凝胶渗透色谱。
凝胶色谱依样品的性质又可分为凝胶渗透和凝胶过滤。
1.凝胶渗透色谱
凝胶渗透色谱（Gel Permeation Chromatography），简称GPC。此一类的色谱，使用于有机性溶媒的样品中，如PVC，PS，ABS等等，而所用的洗脱液有THF，Chloroform等等。
2.凝胶过滤色谱
凝胶过滤色谱（Gel Filtrarion Chromatography），简称GFC。此一种类的层析法，使用于水溶媒的试剂中，如蛋白质、淀粉及水性合成高分子等等，而所用的溶液有水、缓冲液等等。
凝胶的种类很多，按其原料来源可分为有机胶和无机胶。按其制备的方法又可分为均匀、半均匀和非均匀三种凝胶。而根据凝胶的强度又可分为软胶、半硬胶和硬胶三大类。根据它对溶剂的适用范围又可分为亲水性、亲油性和两性凝胶等等。
标准曲线法
标准加入法
外标法
示差法
利胆止痛片中芍药苷的HPLC测定方法步骤是什么?
答：色谱分析在Agilent1100高效液相色谱系统中进行，色谱柱为Zorbax SB-C18，流动相为乙腈-水(15:85)，检测波长为230nm，柱温40℃，进样量为10μL。测定与计算：对照品溶液和供试品溶液均按照上述色谱条件，分别注入液相色谱仪，通过峰面积测量，外标法定量，得出芍药苷的含量。这个过程确保了芍药苷含量的...
建立一个新HPLC定量方法,需主要考察哪些内容
答：药典最后面的附录里面有关于方法学验证的详细内容 一般定量需要测定：准确度，精密度（重复性，中间精密度），专属性，线性，范围，耐用性 如果是杂质的定量，还需要测定定量限
hplc三种定量分析方法结果不一致的原因
答：样品处理要尽量减少操作者的技术问题带来的误差，样品的稀释次数、稀释工具有误差都是结果不一致的原因。2、手动进样误差的来源：作为进样主力，仍是手动进样器，如果使用方法不当，会引起色谱图问题，标准曲线无线性，重复性差。以上两项就是hplc的三种定量分析方法，结果会不一致的原因。
hplc法测定中药制剂中某成分含量时,如何确定选用外标一点法或外标二点...
答：外标法是用待测组分的纯品作对照物质，以对照物质和样品中待测组分的响应信号相比较进行定量的方法称为外标法。内标法就是用在样品中定量加入你要分析的物质，通过测得的实际样品量和加入样品量的比值来定量所要分析的样品含量。内标法主要优点是简单，快速。缺点是没有标准曲线法定量精确。制剂分析...
高效液相色谱仪的使用和原理分析
答：例如,在高效液相色谱法的试验过程中,有时会有异常色谱峰的出现以及重现性不好的问题,这主要是由于操作方法不当所引起,要想解决此类问题,需从以下几个方面入手。 1、进样量的控制。 用进样阀来进样时,阀内的样品环是定量的,(一般分析型进样阀的样品环体积为20ul),由于进样时,注射到进样阀内的样品溶液在...
HPLC与GC的区别?
答：1)HPLC与GC的基本理论大致相同。(2)定性分析、定量分析方法相同。(3)塔板理论可直接搬用(n,H、 R,r2.1，含义，求法，用法与GC一致),(4)保留值参数，如:。、:。、:(保留距离),V，的求法，用法与GC一致。(5)GC的分配系数K在HPLC中，对于液固色谱叫吸附平衡常数，对于尺寸排阻色谱叫渗透...
阿那格雷hplc分析方法
答：【摘要】研究目的：为测出十二名健康志愿者单次口服盐酸阿那格雷胶囊和多次口服给药后，不同时刻血浆样品中阿那格雷的浓度。本次研究建立了一种灵敏度高、分析时间短、重现性好、样品处理简便，适于样品高通量分析的LC-MS/MS（液相色谱-质谱法）定量方法。通过试验数据对口服盐酸阿那格雷胶囊后的体内药动学...
仪器分析试验中怎样定性定量
答：GC：定性用保留值，定量用归一化法 紫外定量用VUV 红外用红外光区电磁辐射选择性吸收的特性进行定量定性分析 HPLC 定量用归一化法 ，内标法，外标法 定性用相对保留面积 原子定量用 标准曲线法，标准加入法
高效液相色谱法测定中药含量采用的方法有哪些?
答：遵照下面的要求选择合适的方法，HPLC法外标、内标两种，检测器一般UV即可。含量测定分析方法验证的可接受标准简介 摘要：本文介绍了在对含量测定所用的分析方法进行方法学验证时，各项指标的可接受标准，以利于判断该分析方法的可行性。关键词：含量测定 分析方法验证 可接收标准 在进行质量研究的过程中，...
如何建立HPLC法测定有关物质的方法
答：现在对三批样品进行测定，通过归一化来观察，应该可以知道杂质的大概情况，根据这个可以定出相应采用自身对照法测定的杂质限量。一般情况下还应定出最大的单一杂质限量。如果样品中的杂质可以很好得到纯品，那么你就可以采用外标法来准确定量。7、杂质的限量必须根据你的样品本身性质来定。
