HPLC分类及其原理
1. 根据流动相和固定相的极性不同，HPLC可以分为正相色谱和反相色谱。
正相高效液相色谱： 色谱柱中的固定相是由硅胶、氧化铝等极性化合物组成。当色谱运行时，由于样品中的极性化合物对固定相有较强的亲和力，使它们在色谱柱中的保留时间比非极性化合物长，因此非极性化合物最先被洗脱出来。许多物质都可以用正相色谱法分析，但由于药物、食物和其他生物制品大都是非极性的，所以在日常生活中应用不如反向色谱法广泛。
反相高效液相色谱 ：固定相由非极性化合物组成，如十八烷基硅烷、C18、C8等有机化合物。流动相是极性的。因此，极性高的化合物最先被洗脱，低极性或无极性的化合物最后洗脱。
HPLC大都是对药物、食品、生化分子等物质进行分析，而它们在自然界中都是极性物质（水溶性）。因此，反相高效液相色谱应用更为广泛。
2. 根据分离原理的不同，HPLC可分为以下六种。
亲和色谱： 主要利用样品与固定性之间的亲和性，实现分离。
离子交换色谱： 基于固定相与流动相的带电基团发生可逆交换，达到分离目的。离子交换树脂用于分离含有带电离子的样品。对于阴离子，使用阴离子交换树脂；对于阳离子，使用阳离子交换树脂。主要用于分离酸性和碱性化合物。
离子对色谱： 在反相色谱的流动相或固定相中加入离子配对剂，与样品中可电离的成分形成“对离子”。常用的离子配对剂有戊烷、己烷、庚烷或辛烷磺酸盐等。
吸附色谱： 是利用吸附性不同的原理，根据样品中的组分对固定相的亲和力不同而发生分离。
空间排阻色谱： 按样品中的组分的分子大小顺序进行分离。色谱柱是由琼脂糖、葡聚糖、聚丙烯酰胺等软凝胶制成，也可用烷基葡聚糖、聚苯乙烯等半刚性凝胶。
手性色谱： 用于分离样品中的光学活性异构体。固定相采用化学键合硅胶。常应用于医药、生物等领域。
3. 根据分析目的不同，HPLC可以分为分析型液相色谱和制备型液相色谱。
分析型液相色谱： 主要利用检测器对混合物中各组分进行定性和定量分析。
制备型液相色谱： 主要是对混合物中各组分进行分离纯化。制备型的色谱柱和进样量都比分析型大。
4. 正如大家所知道的，混合物的分离是由于流动相流过HPLC色谱柱完成的，其中流动相可以是单一的溶剂，也可以是混合溶剂，因此HPLC可以分为等度洗脱和梯度洗脱两种类型。
等度洗脱： 只有一种溶剂，所有的操作都是在一种溶剂下进行的。
梯度洗脱： 流动相由两种或两种以上的溶剂组成，并不断改变其浓度配比。
迪信泰检测平台以液相/气相为依托，组建国际领先的HPLC、LC-MS、GC-MS等检测平台，为广大科研工作者提供高质量、快速、精准的一站式检测服务，涉及生物、食品、药物、化妆品、环境等多领域。
参考资料：Types Of HPLC | Their Principle And Application
高效液相色谱仪的原理及结构
答：二、性质及原理：高效液相色谱按其固定相的性质可分为高效凝胶色谱、疏水性高效液相色谱、反相高效液相色谱、高效离子交换液相色谱、高效亲和液相色谱以及高效聚焦液相色谱等类型。用不同类型的高效液相色谱分离或分析各种化合物的原理基本上与相对应的普通液相层析的原理相似。其不同之处是高效液相色谱灵敏、...
【仪器设备笔记】高效液相色谱HPLC-定义、原理、部件、类型、用途、图表...
答：HPLC，全称为高效液相色谱，是基于柱色谱原理的高级进阶技术。它起源于1960年代，通过从低压玻璃柱发展到高压金属柱，实现了质的飞跃。不同于传统的重力驱动，HPLC在高达400个大气压的高压驱动下，通过流动相（溶剂或混合物）在固定相（微孔颗粒材料）中进行分离。其工作原理是样品通过注...
高压液相色谱的主要类型及其分离原理
答：再者,高效液相色谱的恒温器可使温度从室温调到60C,通过改善传质速度,缩短分析时间,就可增加层析柱的效率。4.检测系统高效液相色谱常用的检测器有紫外检测器、示差折光检测器和荧光检测器三种。(1)紫外检测器该检测器适用于对紫外光(或可见光)有吸收性能样品的检测。其特点:使用面广(如蛋白质、核酸、氨基酸、核苷酸...
关于HPLC的原理的很好的解释,
答：（通常用的最多的是第二种，即分配平衡，）色谱分离原理 高效液相色谱法按分离机制的不同分为液固吸附色谱法、液液分配色谱法（正相与反相）、离子交换色谱法、离子对色谱法及分子排阻色谱法。1．液固色谱法 使用固体吸附剂，被分离组分在色谱柱上分离原理是根据固定相对组分吸附力大小不同而分离。
高效液相色谱原理
答：一、原理：高效液相色谱法的原理是在原始的经典色谱法基础上面引用气象色谐的理论，色谱柱则是用特殊的方式用小颗粒装填而成，造成的结果就是色谱柱的柱效远远高于原始的经典液相色谐，它柱子使用后还能具有高度灵敏度检测器。能够对流出来的分析物进行连续检测。色谱仪是利用混合物各组分在固定相和流动相...
高效液相色谱法的原理是什么?
答：高效液相色谱法的原理是以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测。高效液相色谱法有“四高一广”的特点：①高压：流动相为液体，流经色谱柱时，受到的阻力较大，为了能迅速...
高效液相色谱法( HPLC)的原理是什么?
答：反应的进行程度可以通过不同的方法进行监测，包括薄层色谱法（TLC）和高效液相色谱法（HPLC）等。这些技术都是基于色谱原理，通过对样品中各组分的分离和检测，实现对反应进程的监测。薄层色谱法（TLC）薄层色谱法是一种常用的分离和分析技术，适用于小规模和中等规模的分析。它的主要步骤包括样品制备、点样...
高校液相色谱分离原理是什么?
答：你这个问题光是分离原理就够我打字打半天了。高效液相色谱主要有4种，下面分别描述一下 1。液-固吸附色谱。固定相是固体吸附剂，它是根据物质在固定相是吸附作用差异来分离的。吸附作用越强，K值越大，保留时间越长。2。液-液分配色谱。顾名思义，它是将固定液涂在担体上作为固定相的，它的分离...
液相色谱法有几种类型
答：采用柱色谱技术的一种高效液相色谱法，样品展开方式采用洗脱法。根据不同的分离方式，离子色谱可以分为高效离子色谱 、离子排斥色谱和流动相离子色谱3类。高效离子色谱法使用低容量的离子交换树脂，分离机理主要是离子交换。离子排斥色谱法用高容量的树脂，分离机理主要是利用离子排斥原理。流动相离子色谱用不...
高效液相色谱分析法的原理是什么?
答：【主要类型】1．吸附色谱(Absorption Chromatography)2．分配色谱(Partition Chromatography)3．离子色谱(Ion Chromatography)4．体积排阻色谱(Size Exclusion Chromatography)5．亲和色谱(Affinity Chromatography)【特点】高效液相色谱法有“三高一广一快”的特点：〈1〉高压：流动相为液体，流经色谱柱时，受到的...
