凝胶色谱法的原理

作者&投稿:尧有 (若有异议请与网页底部的电邮联系)
简答题:凝胶色谱的原理是什么?~

凝胶色谱,又称为分子排阻色谱,其分离物质的原理为分子筛原理,且多用于分离有机大分子化合物,如蛋白质、多肽、多糖等.
分子筛效应:一个含有各种分子的样品溶液缓慢地流经凝胶色谱柱时,各分子在柱内同时进行着两种不同的运动,垂直向下的移动和无定向的扩散运动.大分子物质由于直径较大,不易进入凝胶颗粒的微孔,而只能分布颗粒之间,所以在洗脱时向下移动的速度较快.小分子物质除了可在凝胶颗粒间隙中扩散外,还可以进入凝胶颗粒的微孔中,即进入凝胶相内,在向下移动的过程中,从一个凝胶内扩散到颗粒间隙后再进入另一凝胶颗粒,如此不断地进入和扩散,小分子物质的下移速度落后于大分子物质,从而使样品中分子大的先流出色谱柱,中等分子的后流出,分子最小的最后流出,这种现象叫分子筛效应.具有多孔的凝胶就是分子筛.


凝胶色谱法的原理是:凝胶色谱法的固定相为多孔性凝胶类物质,流动相为水溶液或有机溶剂,它是根据不同组分子体积的大小进行分离的。小分子可以扩散到凝胶空隙,由其中通过,出峰最慢;中等分子只能通过部分凝胶空隙,中速通过,而大分子被排斥在外,出峰最快;溶剂分子小,故在最后出峰,全部在死体积前出峰;可对相对分子质量在100-105范围内的化合物按质量分离。

凝胶色谱,又称为分子排阻色谱,其分离物质的原理为分子筛原理,且多用于分离有机大分子化合物,如蛋白质、多肽、多糖等.对高分子物质有很高的分离效果。大分子物质由于直径较大,不易进入凝胶颗粒的微孔,而只能分布颗粒之间,所以在洗脱时向下移动的速度较快。

小分子物质除了可在凝胶颗粒间隙中扩散外,还可以进入凝胶颗粒的微孔中,即进入凝胶相内,在向下移动的过程中,从一个凝胶内扩散到颗粒间隙后再进入另一凝胶颗粒,如此不断地进入和扩散,小分子物质的下移速度落后于大分子物质,从而使样品中分子大的先流出色谱柱,中等分子的后流出,分子最小的最后流出 。

分子筛效应:一个含有各种分子的样品溶液缓慢地流经凝胶色谱柱时,各分子在柱内同时进行着两种不同的运动,垂直向下的移动和无定向的扩散运动.大分子物质由于直径较大,不易进入凝胶颗粒的微孔,而只能分布颗粒之间,所以在洗脱时向下移动的速度较快.

小分子物质除了可在凝胶颗粒间隙中扩散外,还可以进入凝胶颗粒的微孔中,即进入凝胶相内,在向下移动的过程中,从一个凝胶内扩散到颗粒间隙后再进入另一凝胶颗粒,如此不断地进入和扩散,小分子物质的下移速度落后于大分子物质,从而使样品中分子大的先流出色谱柱,中等分子的后流出,分子最小的最后流出,这种现象叫分子筛效应.具有多孔的凝胶就是分子筛.



凝胶色谱法的简要介绍
答:凝胶色谱法又叫凝胶色谱技术,是六十年代初发展起来的一种快速而又简单的分离分析技术,由于设备简单、操作方便,不需要有机溶剂,对高分子物质有很高的分离效果。凝胶色谱法又称分子排阻色谱法。凝胶色谱法主要用于高聚物的相对分子质量分级分析以及相对分子质量分布测试。根据分离的对象是水溶性的化合物还是有...

生物技术实践(1)商品化植酸酶主要来自微生物.在产酶菌株筛选过程中,常 ...
答:Ⅰ中透析液的主要成分为小分子杂质.纯化得到植酸酶的方法,凝胶色谱法:根据蛋白质之间分子大小,吸附性质等差异进行纯化.(或电泳法:根据蛋白质之间电荷,分子大小等差异进行纯化.)(3)PCR技术是利用DNA双链复制的原理,PCR反应包含多次循环,每次循环包括三步:变性,复性,延伸.反应过程中打开模板...

分子排阻色谱法的分离机理
答:但不能进入更小的微孔,在柱中受到滞留,较慢地从色谱柱洗脱出来;小分子可进入凝胶中绝大部分孔洞,在柱中受到更强的滞留,会更慢的被洗脱出;溶解样品的溶剂分子,其分子量最小,可进入凝胶的所有孔洞,最后从柱中流出,从而实现具有不同分子大小样品的完全分离。

高效液相色谱分类
答:2.分配色谱:基于样品在流动相和固定相之间溶解度不同的原理实现分离。比较常见的正相氰基柱(正相)和极为普遍的C18色谱柱(反相)。用来测定的东西很多,化工、制药、化妆品行业都经常使用。3.凝胶色谱:基于根据分子的体积大小和形状不同而达到分离目的。固定相是软质凝胶、半硬质凝胶和硬质凝胶三种。

四大色谱原理是什么?
答:此外还有超临界流体色谱法(SFC),它以超临界流体(界于气体和液体之间的一种物相)为流动相(常用CO2),因其扩散系数大,能很快达到平衡,故分析时间短,特别适用于手性化合物的拆分。按原理分为吸附色谱法(AC)、分配色谱法(DC)、离子交换色谱法(IEC)、排阻色谱法(EC,又称分子筛、凝胶过滤(GFC)、...

凝胶层析法为什么能测出蛋白质的分子量?原理是什么?
答:凝胶层析的优点 凝胶层析具有设备简单,操作方便,分离迅速及不影响分子生物学活性等优点.目前已被广泛应用于各种生化产品的分离和纯化.-,凝胶层析的基本原理 凝胶层析的原理 l 分子大小不同混合物上柱; 2 洗脱开始,小分子扩散进人凝胶颗粒内,大分子被排阻于颗粒之外;3 大小分子分开: 4大分子行程较短,...

凝胶层析分离蛋白质所应用的原理是
答:【答案】:E 凝胶层析的基本原理是依据多孔的载体对不同大小、不同形状的分子的排阻能力不同,从而将混合物中各个组分分开。

比较凝胶层与纸层析在实验原理上的区别
答:1、凝胶层析:凝胶层析的原理为分子筛效应,在洗脱过程中,大分子不能进入凝胶内部而沿凝胶颗粒间的空隙最先流出柱外,而小分子可以进入凝胶颗粒内部的多孔网状结构,流速缓慢,以至最后流出柱外,从而使样品中分子大小不同的物质得到分离。2、纸层析:纸层析其应用的原理是相似相溶原理,是通过分裂系的在...

凝胶色谱的实验技术
答:层析柱层析柱是凝胶层析技术中的主体,一般用玻璃管或有机玻璃管。层析柱的直径大小不影响分离度,样品用量大,可加大柱的直径,一般制备用凝胶柱,直径大于2厘米,但在加样时应将样品均匀分布于凝胶柱床面上。此外,直径加大,洗脱液体体积增大,样品稀释度大。分离度取决于柱高,为分离不同组分,凝胶...

高二生物下册《血红蛋白的提取和分离》知识梳理
答:3 、本课题我们将利用血红蛋白与杂质蛋白哪方面的差异进行提纯?4 、为什么不用鸡的血红细胞而用人的血红细胞作为实验材料?5 、用什么方法分离相对分子质量不同的蛋白质 ?凝胶色谱法 一 凝胶色谱法(分配色谱法):1、什么是凝胶?2、什么是凝胶色谱法?学生活动2:3、凝胶色谱法的原理是什么?4、请用...