反相色谱的原理是什么？

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1、正相色谱基本上可以被看做是液固吸附色谱，其柱填料是吸附剂，其表面上分布有活性吸附位点，溶剂和溶质分子均能被吸附于活性位点上。由于相互作用力有大有小，溶剂分子与溶质分子、溶质分子相互之间又存在竞争吸附，从而造成了在柱内保留时间的差异，使不同物质得到分离。

应用特点：正相色谱一般用来分离中性化合物和离子(或可电离的)化合物，而且以中性样品为主。适于分离样品如下：

①对于反相色谱法很难分离的异构体，可以采用以硅胶为固定相的正相色谱分离分析；

②根据被分离样品极性差别进行族类分离；

③易于水解样品的分离分析；

④分离分析高脂溶性样品，其在极性有机溶剂中溶解度很小；

⑤正相色谱也可以用于异构体分离(包括几何异构体和光学异构体)。

2、流动相极性大于固定相极性的情况，称为反相色谱。非极性键合相色谱可作反相色谱。在现代液相色谱中应用最广泛，现代液相色谱分析工作的70%以上是在非极性键合固定相上进行的。反相介质性能稳定。分离效率高，可分离蛋白质、肽、氨基酸、核酸等含有非极性基团的各种物质。

应用特点：反相介质性能稳定。分离效率高，可分离蛋白质、肽、氨基酸、核酸、甾类、脂类、脂肪酸、糖类、植物碱等含有非极性基团的各种物质。

扩展资料

原理：

反相色谱(RPC)是指利用非极性的反相介质为固定相，极性有机溶剂的水溶液为流动相，根据溶质极性(疏水性)的差别进行溶质分离与纯化的洗脱色谱法。

与HIC一样，RPC中溶质也通过疏水性相互作用分配于固定相表面，但是，RPC固定相表面完全被非极性基团所覆盖，表现出强烈的疏水性。因此，必须用极性有机溶剂(如甲醇、乙腈等)或其水溶液进行溶质的洗脱分离。

溶质在反相介质上的分配系数取决于溶质的疏水性，一般疏水性越大，分配系数越大。当固定相一定时，可以通过调节流动相的组成调整溶质的分配系数。

RPC主要应用于相对分子质量低于5000，特别是1000以下的非极性小分子物质的分析和纯化，也可以用于蛋白质等生物大分子的分析和纯化。

由于反相介质表面为强烈疏水性，并且流动相为低极性的有机溶剂，生物活性大分子在RPC分离过程中容易变性失活，所以，以回收生物活性蛋白质为目的时，应注意选用适宜的反相介质。

参考资料来源：百度百科-正相色谱

参考资料来源：百度百科-反相色谱

正反相液相色谱的出峰顺序
答：正相色谱：固定相极性，流动相是相对非极性，适用于分离极性组分，非极性组分先流出。反相色谱刚好相反。原理是：极性化合物更容易被极性化合物所保留。

什么是正相色谱,反向色谱,ge各有什么特征和应用范围
答：以极性物质做固定相，非极性物质作流动相，即流动相的极性<固定相的极性。正相色谱适用于极性化合物的分离，极性小的先出柱，极性大的后出柱。液相色谱有正相和反相之分。正相色谱和反相色谱还有吸附色谱和极性化学键键合色谱之分。如果采用固定相的极性大于流动相的极性，就称为正相色谱；如果固定相...

什么是反相气相色谱
答：反相气相色谱(Inverse Gas Chromatography)是利用气相色谱技术,研究聚合 物聚集状态性质的一种方法.它是将聚合物样品涂布在色谱载体表面(或将聚合物粉末与载体混合),装入色谱柱,选择一个与聚合物有适当作用的低分子物质(称为"分子探针")注入色谱柱中,测定其保留体积.聚合物的分子运动形式,分子聚集状态不同...

正向高效液相色谱原理?反相高效液相色谱,正相分配色谱,反相分配色谱...
答：键合有醚基的键合相构成中等极性的正相或反相色谱；键合强酸性磺酸型或者强碱性季铵盐型键合相，构成离子交换色谱。正相色谱是色谱的经典形式，使用极性固定相和非极性流动相。洗脱物通过其极性基团和固定相上的极性基团作用被保留。这种应用，经典的是使用未键合的硅胶和氧化铝，但现在使用的极性键合相有...

什么是正相分配色谱和反相分配色谱?
答：正相色谱法：当流动相的极性小于固定相的极性时称正相色谱法，主要用于极性物质的分离分析；反相色谱法：当流动相的极性大于固定相的极性时称反相色谱法，主要用于非极性物质或中等极性物质的分离分析。以高压液体为流动相的液相色谱分析法称高效液相色谱法（HPLC）。其基本方法是用高压泵将具有一定极性的...

什么是正相色谱 什么是反相色谱
答：正相和反相的区别主要指是填料(固定相)的不同。正相色谱柱填料极性强,洗脱顺序由弱到强；反相色谱柱填料极性弱，洗脱顺序由强到弱。1、正相色谱 正相色谱用的固定相通常为硅胶（Silica）以及其他具有极性官能团胺基团，如（NH2，APS）和氰基团（CN，CPS）的键合相填料。由于硅胶表面的硅羟基（SiOH）...

反相高效液相色谱法
答：RP-HPLC是当今液相色谱的最主要的分离模式，几乎可用于所有能溶于极性或弱极性溶剂中的有机物的分离。反相色谱法适于分离非极性，极性或离子型化合物，大部分的分析任务皆由反相色谱法完成。反相高效液相色谱法与高效液相色谱法的区别 高效液相色谱法包括正相高效液相色谱法和反相高效液相色谱法。 正相高效...

正相色谱和反相色谱的区别是什么?
答：天然产物，都可以在反相体系中得到有效分离。3、流动相不同：正相色谱，因为硅胶表面的硅羟基极性大，极性大的水溶性化合物很难被洗脱下来，只有使用更强极性的溶剂才能成功。在反相色谱中，因为极性化合物和固定相的吸附性较小，因此用较小极性的溶剂，就可以实现比较理想的洗脱效果。

凝胶渗透色谱与高效液相色谱有什么区别
答：都属于液相色谱，主要不同是：1 GPC流动相是纯有机溶剂，为正相色谱；HPLC可用含量不超过95%的水溶液，为反相色谱。2 GPC的色谱原理是体积排阻； HPLC的色谱原理是吸附-洗脱。

在气相色谱分析中,试样的出峰顺序是由什么决定的
答：反相色谱主要是以水等极性物质作为流动相，按相似相容原理，出峰先后是从极性强的到极性弱的；而正相色谱的流动相大多为非极性物质，出峰先后则是从弱极性的到强极性的。高中生必须掌握的几种学习方法 爱因斯坦有个成功的公式：A=X+Y+Z.A代表成功，X代表艰苦劳动，Y代表正确方法，Z代表少说废话。